La introducción de la tecnología del ADN recombinante ha permitido la explotación industrial de proteínas con propiedades terapéuticas que permanecían limitadas para su comercialización. Gracias a esto, las proteínas recombinantes juegan un papel muy importante en la medicina moderna. Vacunas, anticuerpos, hormonas y agentes anticancerígenos son sólo algunos ejemplos de la gran variedad de proteínas recombinantes que se pueden obtener al emplear esta tecnología.
A la par del uso de proteínas recombinantes, se ha favorecido el desarrollo de mejores métodos para su producción y purificación. Diversos microorganismos han sido desarrollados como las mejores opciones para expresar proteínas, destacando entre ellos la levadura metilotrófica Pichia pastoris, la cual cuenta con mecanismos de expresión condicionada de proteínas recombinantes y la capacidad para favorecer su secreción al medio de cultivo.
La presente investigación se enfoca en la purificación de la hormona de crecimiento bovina recombinante expresada por la levadura P. pastoris, empleando para esto técnicas cromatográficas que se basan en las características intrínsecas de la proteína de interés para lograr su acondicionamiento hacia el ambiente más adecuado para su posterior utilización en análisis especializados de bioactividad
TABLA DE CONTENIDO
Contenido Página:
Lista de Cuadros
Lista de Figuras
Nomenclatura
CAPÍTULO I. MARCO TEÓRICO
1.1. Introducción
1.2. Antecedentes
1.2.1. Cromatografía de intercambio aniónico
1.2.2. Cromatografía de interacciones hidrofóbicas
1.2.3. Cromatografía de exclusión molecular
1.2.4. Cromatografía líquida de alta resolución
1.3. Justificación
1.4. Hipótesis
CAPÍTULO II. OBJETIVOS
2.1. General
2.2. Particulares
CAPÍTULO III. MATERIAL Y MÉTODOS
3.1. Esquema general del trabajo
3.2. Material
3.2.1. Equipo
3.2.2. Material
3.2.3. Reactivos
3.3. Métodos
3.3.1. Purificación de la bGH
3.3.2. Cromatografía de intercambio aniónico
3.3.3. Cromatografía de interacciones hidrofóbicas
3.3.4. Cromatografía de exclusión molecular
3.3.5. Cromatografía liquida de alta resolución
3.3.6. Western Blot Contenido Página:
3.4. Análisis de proteínas
3.4.1. Electroforesis en geles de poliacrilamida
3.4.1.1. Preparación de soluciones stock
3.4.1.2. Procedimiento
3.4.2. Cuantificación de proteínas totales
CAPÍTULO IV. RESULTADOS Y DISCUSIONES
4.1. Implementación de metodologías
4.2. Esquema de purificación
CAPÍTULO V. CONCLUSIONES
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
-
-
-
-
¡Carge sus propios textos! Gane dinero y un iPhone X. -
-
¡Carge sus propios textos! Gane dinero y un iPhone X. -
-
¡Carge sus propios textos! Gane dinero y un iPhone X. -
-
¡Carge sus propios textos! Gane dinero y un iPhone X. -
-
¡Carge sus propios textos! Gane dinero y un iPhone X. -
-
¡Carge sus propios textos! Gane dinero y un iPhone X. -
-
¡Carge sus propios textos! Gane dinero y un iPhone X. -
-
¡Carge sus propios textos! Gane dinero y un iPhone X. -
-
¡Carge sus propios textos! Gane dinero y un iPhone X. -
-
¡Carge sus propios textos! Gane dinero y un iPhone X. -
-
¡Carge sus propios textos! Gane dinero y un iPhone X. -
-
¡Carge sus propios textos! Gane dinero y un iPhone X.